一、概要
三聚氰胺是一种低、无味的纯白色单斜棱晶体,形似蛋,属于三嗪类含氮杂环有机化合物,广泛应用于塑料、染料、化肥的生产和纺织行业。由于三聚氰胺分子含氮量很高,只要添加到食品中就可在检测中造成蛋白质含量较高的假象。目前在饲料、牛奶、奶粉、饼干、奶糖等相关产品均发现有三聚氰胺残留现象。动物实验结果表明,三聚氰胺的摄入可能会导致繁殖障碍、膀胱炎、慢性肾炎、肾结石、甚至膀胱癌。现有的检测三聚氰胺方法如液相色谱-质谱联用法、质谱电喷射离子技术其样品前处理复杂、所需仪器昂贵、操作复杂、耗费时间。而使用三聚氰胺ELISA试剂盒能够既快速又准确的分析样品中三聚氰胺残留。
本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,操作时间短于45min,能很大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被三聚氰胺抗原,样本残留的三聚氰胺和微孔条上预包被的抗原竞争抗三聚氰胺抗体,加入TMB底物显色,样本吸光值与其残留物三聚氰胺成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中三聚氰胺的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测奶粉、牛奶、酸奶等乳制品及饲料样本中三聚氰胺的残留量。
四、交叉反应率
三聚氰胺………………………………………………100%
五、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度:3 ppb
样本检测限:
奶粉……………………………………………………30ppb
发酵乳/奶油……………………………………………9ppb
纯牛奶、生鲜奶…………………………………………3ppb
回收率:
奶粉…………………………………………………100±10%
酸奶…………………………………………………80±10%
纯牛奶、生鲜奶……………………………………100 ± 10%
精密度:
试剂盒的变异系数均小于10%
六、注意事项
1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、每加一种试剂前需将其摇匀。
4、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、储存条件
保存试剂盒于2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
7、试剂变质的迹象
发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5<>)时,表示试剂可能变质。
8、在加入底物液后,一般显色时间为10~15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20min(或更长),但不得超过20min。反之,则减短反应时间。
9、该试剂盒推荐反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
七、贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。